培养基、接种、规范
2021年4月12日
14:38
基本和常用成分
碳源、氮源、无机盐、水；生长因子和指示剂等。
营养物质
蛋白胨
蛋白质不完全水解。
溶于水、吸水。
138摄氏度也不凝固。
游离氨基酸
两性电解质，缓冲作用
遇酸不沉淀
肉浸夜
新鲜牛肉浸泡煮沸（去掉肌膜、脂肪、肌腱）
含氮物质（氨基酸较少）、碳源、生长因子。
牛肉膏
肉浸夜加热浓缩，不耐热物质已经破坏。（无糖类物质）
肠道细菌鉴别培养基基础成分。
糖、醇类
单糖多糖那些，甘露醇等
用于鉴别。
肠道致病菌多数不发酵乳糖
大肠埃希菌等飞致病菌发酵乳糖。
注意避免高温，分别灭菌。
血液
辅酶（V因子）、血红素（X因子）
测定细菌溶血作用。
鸡蛋与动物血清
某些特殊细菌的必须成分
结核分枝杆菌和白喉棒状杆菌等特殊培养基
凝固剂作用，便于观察。
无机盐
钾离子钠镁铁磷酸盐、、、、
自来水含有大部分微量元素
生长因子
维生素等
动物血清、酵母浸膏、肉膏有大部分
水
溶剂等
凝固物质
琼脂、明胶、蛋白血清等，后二者有营养
琼脂
海藻提取物，无营养，赋形剂。
45℃下固态、98℃上溶于水。
琼脂含量，半固体或固体。
明胶
动物胶原组织（皮和肌腱）蛋白质。熬制。缺乏必须氨基酸、营养价值不打。
20℃一下固态，37摄氏度液态，有的细菌分解液化。常用与鉴别。
抑制剂
为了目的菌生长其他菌不生长或少生长。
指示剂
观察发酵糖产酸、氨基酸脱羧变碱。
酸碱指示剂
酚红、溴麝香草酚蓝、甲基红等等
氧化还原
甲基蓝常用
培养基类型
按用途分类
基础培养基
只含有最基本营养成分，用于细菌一般增殖。
也可作为特殊培养基的基础成分
肉汤培养基、普通琼脂平板、LB培养基
营养培养基
在基础培养基加入葡萄糖血清等，供给营养要求高的细菌（结核分枝杆菌、奈瑟菌、白喉棒状杆菌等等）
血清肉汤培养基、血琼脂培养基、巧克力色血琼脂培养基、吕氏血清琼脂培养基
鉴别培养基
特定成分及指示剂，细菌生化反应鉴别。
单糖发酵培养基、伊红亚甲蓝琼脂培养基、双糖铁培养基、尿素培养基、枸橼酸盐培养基、蛋白胨水培养基。
选择培养基
只有你能利用
其他的被抑制
SS培养基
罗氏培养基（结核分枝杆菌）
亚帝酸钾血清培养基（白喉棒状杆菌）
加入青霉素、四环素、链霉素（抑制放线菌和细菌，酵母菌真菌分离出来）
胆盐、煌绿、亮绿抑制革兰氏阳性
特殊培养基
对营养无要求，对其他：气体渗透压特殊要求。
厌氧培养基、细菌L型培养基
物理性质分类
液体
增殖和观察生化反应
半固体
动力观察和菌体保存
固体
分离、计数、选择、药敏
斜面传代和保存
高斜面用于生化反应及鉴定
平板划线接种法
标记
在培养皿底部，标记菌名、姓名、学号、日期
灭菌接种环
烧丝到红再烧环
环到杆反反复复通过火焰
火焰十厘米内冷却
取种
左手持种右手小指拔塞子，管口迅速过火
取菌
管口过火闭塞
分离划线
左手持平板，竖着拿防止空气菌进
1/10，小夹角，轻快滑动
旋转90°，灭菌冷却
1/5，小夹角，两三次交叉
旋转90°，灭菌冷却
1/4通过两三次
旋转90°不用灭菌画满即可
倒放平板
防止蒸馏水低落冲散菌落
培养观察
斜面培养基接种法
标记
点灯
左手持两管，右手松塞
注意小水珠
右手持接种环灭菌
小指手掌，无名指小指拔塞，管口灭菌
挑少量菌苔
防止取菌过多，防止滑坡表面
从底部曲线划出，不要碰壁
灭菌塞口
液体培养基接种方法
标记
左手持管及肉汤
同斜面